Если выбраная цветовая система не поддерживащая 16-битную глубину цвета (Grayscale, Indexed Color...) то само собой галочку на 16 bit Вы не сможете поставить.
Скорей всего Вы работаете с рисунком для интернета (gif) и он открыт в цветной системе Indexed Colors.
нет, у меня RGB Color, но все равно не могу поставить Работаю не с гифом а с PSD